Результаты исследования.

Возраст в нашем исследование колебался от 20 лет до 91 года. При сравнении групп по возрастному составу выявлено, что в 1 группу вошли более возрастные пациенты, различия достоверны.

Таблица 1. Распределение пациентов по возрастам в группах.

*- р=0,03; ** - р=0,002

Таблица 2. Распределение пациентов в зависимости от степени дифференцировки опухоли.

Мы не получили достоверных различий в распределении по фактору дифференцировки рака в 1 и 2  группах. (р>0,05).

При лечении пациентов картина в мочевом пузыре оценивалась по параметрам оценки относящихся к факторам прогноза течения заболевания (количество очагов, размер первичной опухоли). Данные представлены в таблице 3.

Таблица 3.

В 1 группе большее количество больных с единичным очагом, различия достоверные (p

<0,05). При сравнении по размерам первичной опухоли определена тенденция к большему количеству пациентов с размером первичной опухоли <3 см. Первая группа - 58 человек (69,9%) и 44 во второй (54,4%), однако различия недостоверные (p >0,05).

Таблица 4.

По нашим данным в опухолевой ткани мышечно-неинвазивного РМП и в слизистой оболочке мочевого пузыря без опухолевого роста (рак в анамнезе). Получено достоверное повышение в опухолевой ткани экспрессии ряда маркеров пролиферации. Первым исследованным нами маркером являлся Ki-67 (p <0,02).

При изучении опухолевых биомаркеров в качестве центральной характеристики брали медиану, в качестве меры разброса – квартили и применяли непараметрические методы анализа (например, критерий Краскела – Уоллиса, медианный тест). В таблице 5 представлены данные Ki-67 по медианам и квартилям.

Таблица 5. Данные измерения Ki-67 по группам

*- p <0,03; **-p <0,01

В 1 группе значение медианы равно 39,4, во 2 группе – 2, в 3 группе -7,7, полученные различия статистически значимы (p <0,05). По уровню экспрессии Ki-67 было разделение на 2 подгруппы.

Таблица 6. Распределение по уровню экспрессии Ki-67

*- р <0,0001

Нами определена тенденция к повышению количества образцов ткани с низким уровнем белка Ki-67 во 2 группе. 24 (28,9%) в первой, во 2 группе –54,3% и 31,4% в третьей. Данные по средним значениям среди повышенных значений показателя Ki-67 представлены в таблице 7. В группе 1 медиана 76,1 (во 2– 10,6, в 3– 14,7), различия достоверны (p

<0,0001).

Таблица 7. Данные изменения высокого уровня Ki-67 по группам.

*- р <0,0001

Рисунок 1. Изменения медианы Ki-67 по группам

Из приведенных выше данных можно сделать вывод о достоверном повышении Ki-67 в группе 1, площадь под кривой составила 0,81±0,04.

Рисунок 2

Рисунок 2. ROC-кривые при экспрессии Ki-67

Расчеты показателей чувствительности (т.е. вероятность наличия рака) и показателя специфичности (т.е. пациент находится в ремиссии или мочевой пузырь без онкологии) представлены в таблице 8.

Таблица 8. Данные чувствительности и специфичности показателя Ki-67

Рисунок таблицы

*- p <0,0001

При сравнении групп по уровню Ki-67 в зависимости от характеристик опухоли, возраста, пола и клинических проявлений заболевания проявилась тенденция к повышению уровня данного показателя при наличии гематурии, при размерах опухоли ≥ 3, при появлении отделенных метастазов (полученные различия недостоверны). Таблица 9

Таблица 9. Зависимость экспрессии Ki-67 от клинических и анамнестических факторов

Анализ безрецидивной выживаемости

На рисунке 3 представлен график безрецидивной выживаемости (БРВ) в зависимости от уровня экспрессии Ki-67. При Ki-67 £ 35 о.е. – медиана БРВ составила 13 месяцев, 1- летняя БРВ – 57,7 ± 8,1%, 2-х летняя – 39,8 ± 9,4% (р=0,02).

Рисунок 3. Безрецидивная выживаемость в зависимости от уровня экспрессии Ki67

Нами проведен многофакторный анализ сочетания BIRC5 и Ki-67 с безрецидивной выживаемостью.

Распределение пациентов с учетом уровня экспрессии белков относительно пороговых значений выглядело следующим образом: у 11-ти больных при BIRC5 £ 60 + Ki- 67 £ 35, т.е. уровни экспрессии ниже пороговых значений, медиана БРВ составила 40,7 месяцев, при 1-2-3-хлетней безрецидивной выживаемости – 80,2 ± 10,3%, 5-тилетняя БРВ – 40,1 ± 28,8%.

При повышении уровня экспрессии хотя бы одного из белков выше пороговых значений медиана БРВ – 18,7 месяцев. Эти данные представлены на рисунке 33, здесь пациенты разделены на 2 группы, в 1-ую вошли больные с низким уровнем экспрессии обоих онкомаркеров, во 2-ую - все остальные пациенты: BIRC5 высокий + Ki67 низкий; BIRC5 высокий + Ki-67 высокий; BIRC5 низкий + Ki-67 высокий.

При BIRC5 >60 + Ki-67> 35, т.е. имеет место высокий уровень экспрессии белков, медиана безрецидивной выживаемости 12,7 месяцев, 1-летняя БРВ – 54,2 ± 9,5%, 3-х летняя

– 19,2 ± 14,5%.

Медиана безрецидивной выживаемости в 1 группе составила 40,7 мес., во 2 – 13,7 мес. (р=0,024), 1-летняя БРВ – 55,1 ± 8,5%. Таким образом в каждом втором случае прогнозируется рецидив через 12 месяцев. Рисунок 4.

Рисунок 4. Безрецидивная выживаемость BIRC5 + Ki67

Обсуждение.

Ki-67 – это ядерный белок, связанный с транскрипцией рибосомной РНК и является маркером клеточной пролиферации [12]. Ki-67 гиперэкспрессируется в активно растущих опухолевых клетках и указывает на плохой прогноз заболевания.

Сурвивин, также известный как BIRC5 (baculoviral inhibitor of apoptosis repeat – containing 5) – металлопротеин, относится к семейству ингибиторов апоптоза. Его функцией считается блокирование процессов апоптоза. Ингибирует Bax- и Fas-зависимые сигнальные пути. Сурвивин экспрессируется в раковых стволовых клетках [13].

Выводы.

Таким образом, нами определена прогностическая роль и значимость Ki-67 и сочетания Ki-67 + BIRC5. С учетом приемлемой для медицинских исследований информативностью (>75%) по данным нашей работы Ki-67 и BIRC5 можно считать биомаркером агрессивности мышечно-неинвазивного РМП.